Proprietà biofisiche e biochimiche del PHGDH rivelate da studi sugli inibitori del PHGDH

L’enzima limitante la biogenesi della serina PHGDH è sovraespresso nei tumori. Sia l’astinenza da serina che l’inibizione genetica/farmacologica del PHGDH hanno dimostrato promettenti attività di soppressione del tumore. Tuttavia, le proprietà enzimatiche del PHGDH non sono ben comprese e la scoperta degli inibitori del PHGDH è ancora agli inizi. Qui, l’oridonina è stata identificata da una libreria di prodotti naturali come un nuovo inibitore di PHGDH. La struttura cristallina di PHGDH in complesso con oridonina ha rivelato un nuovo sito allosterico. Il legame dell’oridonina a questo sito ha ridotto l’attività dell’enzima spostando R54, un residuo coinvolto nel legame al substrato.
Gli studi di mutagenesi hanno mostrato che l’attività di PHGDH era molto sensibile alle mutazioni della cisteina, specialmente quelle nel dominio di legame del substrato. La coniugazione di oridonina e altri inibitori covalenti della PHGDH segnalati a questi siti inibirà quindi la PHGDH. Oltre ad essere inibito enzimaticamente, PHGDH può anche essere inibito dall’aggregazione proteica e dalla degradazione mediata dal proteasoma. Diversi mutanti del cancro PHGDH testati hanno mostrato un’attività enzimatica alterata, che può essere spiegata dalla struttura e dalla stabilità delle proteine. Nel complesso, gli studi di cui sopra presentano nuove intuizioni biofisiche e biochimiche sul PHGDH e possono facilitare la futura progettazione di inibitori del PHGDH.

Progettazione, sintesi, approfondimenti chimici e biochimici su nuovi inibitori ibridi di p53-MDM2 a base di spirooxindolo con potenziale attenuazione del segnale Bcl2

 

La resistenza del tumore agli attivatori di p53 ha rappresentato una sfida clinica. Studi di combinazione hanno rivelato che la somministrazione concomitante di inibitori Bcl2 può sensibilizzare le cellule tumorali e indurre l’apoptosi. In questo studio, abbiamo utilizzato un percorso sintetico rapido per sintetizzare due nuovi inibitori ibridi di p53-MDM2 a base di spirooxindolo dotati di attenuazione del segnale Bcl2.
Gli addotti imitano le caratteristiche tematiche del potente spiro chimicamente stabile [3 -indolo-3,2′-pirrolidina] -2 (1 ) -ones p53-MDM2 inibitori, mentre si installa un anello pirrolico tramite un distanziatore carbonilico ispirato ai prodotti naturali marini o sintetici che inibiscono efficacemente le funzioni della famiglia Bcl2. Un’analisi chimica dei due spirooxindoli sintetizzati, inclusa l’analisi di diffrazione dei raggi X su cristallo singolo, ha confermato senza ambiguità le loro strutture.
Gli spiroossindoli sintetizzati 2a 2b sono stati preliminarmente testati per attività citotossiche contro cellule normali, MDA-MB 231, HepG-2 e Caco-2 via > saggio MTT. 2b era superiore al 5-fluorouracile. Meccanicisticamente, 2b ha indotto un effetto antitumorale dipendente dall’apoptosi (43%) superiore a quello del 5-fluorouracile (34,95%) in tre linee cellulari tumorali studiate, ha attivato p53 (47%), ha sottoregolato il gene Bcl2 ( 1,25 volte) e p21 sovraregolato (2 volte) nelle cellule tumorali trattate. Le simulazioni di docking hanno dichiarato le possibili modalità di legame dei composti sintetizzati all’interno di MDM2.

Elementi strutturali e biochimici di substrati del proteasoma efficientemente degradabili

La maggior parte della proteolisi regolata nelle cellule è condotta dal sistema ubiquitina-proteasoma, in cui le proteine da eliminare sono selezionate attraverso più passaggi per ottenere un’elevata specificità. Il grande complesso proteasi proteasoma si lega alle molecole di ubiquitina che sono attaccate al substrato e interagisce ulteriormente con una regione disordinata nel bersaglio per avviare lo spiegamento per la degradazione. Studi recenti hanno ampliato la nostra visione della complessità dell’ubiquitinazione, nonché i dettagli dell’impegno del substrato da parte del proteasoma e allo stesso tempo hanno suggerito le caratteristiche dei substrati che sono suscettibili di degradazione proteasomiale.
Qui, esamino alcuni elementi destabilizzanti dei substrati del proteasoma con particolare attenzione all’ubiquitinazione, alla regione di iniziazione e alla stabilità contro l’unfolding e discuto la loro interazione per determinare la stabilità del substrato. Una prospettiva spaziale è importante per comprendere il meccanismo d’azione della degradazione proteasomica, che può essere fondamentale per lo sviluppo di farmaci mirati al sistema ubiquitina-proteasoma, inclusa la degradazione proteica mirata.

Intervalli di riferimento per gli analiti ematologici e biochimici in un singolo allevamento di asini castrati clinicamente sani a Saint Kitts

 

C’è una grande popolazione di asini a Saint Kitts; Tuttavia, mancano gli intervalli di riferimento ematologici e biochimici (IR). Questo studio ha affrontato questa carenza seguendo le linee guida RI dell’American Society for Veterinary Clinical Pathology. Sessantasei asini castroni sani standard con un’età media e interquartile di 5 anni (3,5 – 8 anni) e un corpo medio ± deviazione standard del peso di 156 ± 16,7 kg sono stati utilizzati per produrre un emocromo completo differenziale in cinque parti utilizzando un analizzatore di impedenza. Gli analiti di chimica clinica sono stati quantificati utilizzando un analizzatore fotometrico che utilizza due rotori di reagenti che determinano rispettivamente 14 e 11 analiti.

 

Un analizzatore elettrochimico quantifica cloruro, sodio e potassio. Gli intervalli di riferimento sono stati calcolati utilizzando Reference Value Advisor. I risultati degli analiti determinati utilizzando diversi rotori/analizzatori sono stati valutati utilizzando la regressione di Passing-Bablok e le analisi del grafico di Bland-Altman. Sono stati generati gli intervalli di riferimento per 43 analiti ematologici e biochimici. Gli intervalli di riferimento per ematocrito, globuli rossi, globuli bianchi, proteine totali, glucosio, azoto ureico e creatinina erano 23,67 – 38,08%, 4,08 – 6,42 10 12 / L, 4,7 – 12,34 10 < sup> 9 / L, rispettivamente 5,84 – 6,93 g / dL, 64,7 – 130,9 mg / dL, 11,1 – 13,4 mg / dL e 0,67 – 1,36 mg / dL. C’era un buon accordo tra il sistema di rilevamento di albumina, aspartato aminotransferasi, gamma glutamil transferasi, proteine totali, globuline e potassio, ma non per azoto ureico, calcio, creatinina chinasi e sodio. Questo studio è il primo a stabilire le RI ematologiche e biochimiche negli asini di Saint Kitts. Questi valori saranno utili per il processo decisionale clinico.

Comportamenti e risposte biochimiche dei macroinvertebrati Corbicula fluminea alle microplastiche di polistirene

 

La microplastica, un contaminante emergente ben documentato, è molto diffuso negli ambienti acquatici a causa della produzione e della frammentazione di oggetti di plastica di grandi dimensioni. La conoscenza degli effetti tossici cronici e della tossicità comportamentale delle microplastiche, in particolare sui macroinvertebrati bentonici d’acqua dolce, è limitata. In questo studio, vongole asiatiche adulte (Corbicula fluminea) sono state esposte a soluzioni microplastiche a gradiente per 42 giorni per valutare la tossicità comportamentale e la biotossicità cronica. I risultati hanno mostrato che le microplastiche causavano tossicità comportamentale, stress ossidativo e danni ai tessuti nei trattamenti ad alta concentrazione. Il sifonamento, la respirazione e l’escrezione sono stati significativamente inibiti (p & lt; 0,05) a trattamenti ad alta concentrazione, suggerendo che le microplastiche ad alta concentrazione inducono tossicità comportamentale in C. fluminea.
Il contenuto di malondialdeide, le attività di superossido dismutasi, catalasi e glutatione reduttasi erano significativamente migliorate (p & lt; 0,05) e l’acetilcolinesterasi era significativamente inibita (p & lt; 0,05) per tutto il periodo di esposizione nei trattamenti ad alta concentrazione. Gli enzimi associati all’approvvigionamento energetico erano significativamente più alti nei trattamenti con microplastiche ad alta concentrazione su D7 e D21. Tuttavia, hanno recuperato a un livello normale su D42. L’instabilità degli enzimi indicava che le microplastiche ad alta concentrazione inducevano stress ossidativo e disturbi nella neurotrasmissione e nell’approvvigionamento energetico. Le branchie di C.
fluminea nei trattamenti hanno subito una degenerazione delle ciglia, il che ha indicato che le microplastiche hanno causato danni ai tessuti nelle branchie. L’analisi dei valori di risposta dei biomarcatori integrati ha rivelato che le microplastiche ad alta concentrazione hanno portato a effetti a lungo termine sulla salute di C. fluminea. In conclusione, l’esposizione continua alle microplastiche (10 mg L -1 ) danneggerebbe il comportamento fisico e il sistema antiossidante di C. fluminea.

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