-
- Le leucotossine binarie prodotte da Staphylococcus aureus uccidono le cellule immunitarie dell’ospite mediante lisi osmotica creando pori β-barile nella membrana cellulare dell’ospite.
- L’attuale modello di formazione dei pori a due componenti suggerisce che i pori ottamerici, costituiti da due polipeptidi secreti separati (subunità S e F), sono assemblati da monomeri idrosolubili nell’ambiente extracellulare e multimerizzati sulle membrane cellulari bersaglio.
- Tuttavia, non è stato ancora stabilito se tutti i membri della famiglia delle leucotossine stafilococciche binarie presentino queste proprietà. In questo studio, riportiamo che la leucocidina A / B ( LukA B), il membro più divergente della famiglia delle leucotossine, esiste come eterodimero in soluzione piuttosto che come due subunità monomeriche separate.
- In particolare , questa proprietà è risultata associata ad un’aumentata attività della tossina. LukA B differisce anche dalle altre leucotossine a due componenti in quanto la subunità S ( LukA ) contiene estensioni di 33 e 10 amminoacidi rispettivamente al capolinea N e C.
- La mutagenesi troncata ha mostrato che la delezione N-terminale ha causato un leggero aumento della citotossicità di LukA B, mentre la delezione C-terminale ha provocato l’inattività della tossina.
- Al C-terminale di LukA , abbiamo identificato l’acido glutammico in posizione 323 che è fondamentale per la citotossicità di LukAB .
- Inoltre, abbiamo scoperto che questo residuo è conservato e richiesto per l’interazione tra LukA B e il suo bersaglio cellulare CD11b. Nel loro insieme, questi risultati forniscono un’analisi approfondita di come LukA B attacca i neutrofili e identificano nuovi bersagli adatti per la progettazione razionale di inibitori anti – LukA B.
Identificazione dell’antigene purificato legante il complemento come antigene nucleare definito dal virus di Epstein-Barr (EBNA) dal suo legame ai cromosomi in metafase.
- L’antigene solubile legante il complemento trasportato dalle cellule umane trasformate con il virus di Epstein-Barr (EBV) è stato precedentemente estratto dai nuclei e purificato mediante cromatografia di DNA-cellulosa [ Luka , J., Siegert, W. & Klein, G. (1977) J .Virol., in stampa].
- Mediante l’aggiunta di questo antigene ai cromosomi in metafase fissati con metanolo/acido acetico seguita dall’esposizione al siero umano contenente anticorpi contro l’antigene nucleare EBV (EBNA), è stata ottenuta un’eccellente colorazione positiva mediante immunofluorescenza anti-complemento . Non è stata rilevata alcuna colorazione dopo l’esposizione a sieri negativi per EBV.
- Inoltre, la frazione proteica nucleare preparata in modo analogo dalla linea cellulare negativa per EBV non ha indotto una reazione di colorazione. Questi dati identificano l’ antigene solubile purificato come l’ antigene nucleare designato da EBV . L’ antigene purificato ha un peso molecolare di 174.000 +/- 15.000 come determinato da esperimenti di centrifugazione in gradiente di saccarosio e filtrazione su gel.
- In tamponi neutri contenenti 0,5-1,0 M NaCl, l’antigene si dissocia a circa la metà del suo peso molecolare originale mantenendo l’attività di fissazione del complemento . Questo “monomero” ha un peso molecolare di 98.000 +/- 8.000.
Effetti in vitro di inquinanti particellari e campioni di aria volatile – variabilità diurna e notturna.
- Le sostanze chimiche nell’aria sono state caratterizzate per il loro potenziale di interferire con la segnalazione dei recettori degli estrogeni, degli androgeni e degli idrocarburi arilici (AhR) noti per svolgere un ruolo importante nei cambiamenti di interruzione del sistema endocrino in vivo.
- In precedenza, tali effetti venivano studiati principalmente nelle polveri sospese nell’aria atmosferica provenienti da varie località. In questo studio, le frazioni d’aria volatili e particellari provenienti da tre siti in
- La regione di Banja Luka (Bosnia ed Erzegovina) è stata studiata per descrivere la distribuzione di inquinanti che alterano il sistema endocrino su piccola scala spaziale. La variabilità giornaliera dell’inquinamento atmosferico è stata studiata raccogliendo campioni sia di giorno che di notte.
- I campioni d’aria prelevati dalle città di notte hanno prodotto effetti dipendenti da AhR rispetto a quelli raccolti durante il giorno.
- Questa tendenza non è stata osservata nella località rurale di riferimento. Nessuno dei campioni ha mostrato una significativa attività estrogenica o androgena.
- D’altra parte , l’antiandrogenicità è stata rilevata sia nella fase polverosa che in quella del vapore, mentre l’antiestrogenicità è stata rilevata solo nella frazione polverosa dell’aria di tutte le località.
- Le forze del campione mediate da AhR erano principalmente associate a composti labili. Sulla base delle concentrazioni dei 28 singoli composti, gli IPA rappresentavano circa il 30% della potenza mediata da AhR determinata da un saggio biologico.
- I risultati mostrano che potrebbe esserci una differenza significativa tra i livelli di composti bioattivi nell’aria tra il giorno e la notte
Anticorpi monoclonali contro Staphylococcus aureus La leucotossina AB a due componenti, isolata dopo un’infezione umana invasiva, rivelano vari legami e modalità d’azione.
La leucotossina binaria LukA B è essenziale per colpire e uccidere i neutrofili umani nello Staphylococcus aureus ex vivo ed è prodotta in condizioni di infezione umana.
Vi presentiamo 3 anticorpi monoclonali umani ( mAb) specifici per LukA B con diversi meccanismi di neutralizzazione delle tossine ed efficacia in vivo. Tre ibridomi secernenti mAbs anti – LukA B (designati SA-13, -15 e -17) sono stati generati da cellule B ottenute da un ragazzo di 12 anni con osteomielite da S. aureus.
Ciascuno dei 3 mAbs ha neutralizzato la tossicità dei neutrofili mediata da LukA B , ha mostrato diversi livelli di potenza, ha riconosciuto diversi siti antigenici sulla tossina e ha mostrato almeno 2 diversi meccanismi di inibizione citotossica. SA-15 legato esclusivamente alla forma dimerica della tossina, suggerendo che i linfociti B umani riconoscono gli epitopi sulla forma dimerizzata di LukA B durante l’infezione naturale.
Sia SA-13 che SA-17 hanno legato il monomero LukA e il dimero LukA B. Sebbene tutti i 3 mAb abbiano fortemente neutralizzato la citotossicità, solo SA-15 e SA-17 hanno inibito significativamente il legame della tossina alla superficie cellulare. Il trattamento con una miscela 1: 1 di SA-15 e SA-17 mAb ha prodotto un numero significativamente inferiore di colonie batteriche nel cuore, nel fegato e nei reni nel modello murino di S. aureus sepsis. Questi dati descrivono l’isolamento di vari ed efficaci mAbs anti – tossina.
- Nella patogenesi dello Staphylococcus aureus gram-positivo , le tossine che formano pori (PFT) come le leucocidine e le emolisine svolgono un ruolo significativo nella patogenesi degli stafilococchi uccidendo le cellule immunitarie dell’ospite e i globuli rossi (RBC).
- Non è noto, tuttavia, quale combinazione di antigeni della tossina susciterebbe la più ampia risposta immunitaria protettiva contro queste tossine .
- In questo studio, prendendo di mira i sei principali PFT stafilococcici (cioè, HlgAB, HlgCB, LukA B, LukED, LukSF-PV e Hla), abbiamo generato dieci tossine ricombinanti o subunità di tossine, tre tossoidi e i loro anticorpi di coniglio .
- Utilizzando un test citolitico per globuli rossi e cellule polimorfonucleate (PMN), abbiamo determinato la migliore combinazione di anticorpi anti-tossina per la più ampia protezione contro la PFT stafilococcica.
- Sebbene le IgG anti -HlgA (HlgA-IgG) abbiano mostrato una bassa reattività crociata con altri componenti della tossina, la protezione dei globuli rossi e umani di coniglio e dei PMN umani era essenziale.
- Il tossoide Hla H35L IgG era richiesto anche per proteggere i globuli rossi del coniglio , mentre LukS-IgG e LukA E323A B-IgG erano richiesti anche per i PMN umani.
- Quando le tossine/tossoidi degli antigeni HlgA, LukS-PV, Hla H35L e LukA E323A B sono stati utilizzati per immunizzare i conigli , hanno aumentato il tasso di sopravvivenza dei conigli; tuttavia, non hanno bloccato la formazione di ascessi stafilococcici nei reni.
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GB114280 Wuhan Servicebio Technology 100 μL 100 EUR Sulla base di questi risultati , abbiamo proposto che la combinazione di HlgA, LukS, Hla H35L e LukA E323A B sia il componente ottimale del vaccino per proteggere i globuli rossi e i PMN umani dalla PFT stafilococcica.
Abbiamo anche concluso che un vaccino efficace contro lo S. aureus richiede non solo questi antigeni della tossina, ma anche altri antigeni che possono indurre una risposta immunitaria che blocca la colonizzazione stafilococcica.
ESB-ITA Frontier Biomechanical Cardiovascular Physiopathology
Normal human cell culutre and cell lines media cytokines